（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体供应商的订购信息:
别 名 MGC41878; PKC B; PKC beta; PKCB; PKCB1; PKCB2; PKCbeta; PRKCB 1; PRKCB 2; PRKCB; PRKCB I; PRKCB II; PRKCB1; PRKCB2; Protein kinase C beta 1; Protein kinase C beta 1; Protein kinase C beta 2; Protein kinase C beta; Protein kinase C beta type; KPCB_HUMAN.
英文名称 Anti-phospho-PKC beta 1/2(Thr500)
中文名称 磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体
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产品名称 |
磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗体供应商 |
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英文名称 |
Anti-phospho-PKC beta 1/2(Thr500) |
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规 格 |
0.1ml/100μg 1ml/1mg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 1ml/1mg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 81kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PKC beta around the phosphorylation site of (Thr500)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
U266细胞，人骨髓瘤细胞 串珠镰刀菌 人胚肾二倍体细胞;HEK-2尼罗替尼-d3Nilotinib-d3质量规格：美国进口
TE-11(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×27α-硫代甲基螺内酯-d7 (主要的)7α-Thiomethyl Spironolactone-d7 (Major)质量规格：美国进口
HO-8910(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS17α-硫代甲基螺内酯7α-Thiomethyl
Spironolactone质量规格：美国进口
人真皮微血管内皮细胞裂解物HDMECL7α-硫代螺内酯7α-Thio Spironolactone质量规格：美国进口
PRSS27 Others
Human 人 PRSS27 / Pancreasin / Marapsin 人细胞裂解液 (阳性对照) 6β-羟基-7α-(硫代甲基) 螺内酯6β-Hydroxy-7α-(thiomethyl)
Spironolactone质量规格：美国进口
Mo7e细胞，人巨细胞白血病细胞株 小鼠正常肝细胞,NCTC1469细胞 角腊上皮细胞生长添加物CEpiCGS五味子酚（标准品）schisanhenol 质量规格：HPLC≥98%，标准品
NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-3,5-二-L-酪氨酸FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH质量规格：>98%,BR
BT-474(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠表皮角化细胞完全培养基100mL 人Burkkit**瘤细胞;Daudi10-脱乙酰巴卡亭(标准品)10-Deacetylbaccatin III质量规格：HPLC≥98%，标准品
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+10-脱乙酰巴卡亭10-Deacetylbaccatin III质量规格：>98%,BR
DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素B1(标准品)vitamin B1质量规格：HPLC≥99%，标准品
L W-3A(小鼠皮下结缔组织细胞) 5×106cells/瓶×2聚酰胺粉(柱层析用)质量规格：柱层析用Polyamide
AAV-293(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R027大鼠食管上皮细胞完全培养基100mL 人羊膜细胞;WISH聚酰胺粉(柱层析用，200-400目)质量规格：柱层析用，200-400目Polyamide
CM-H111人成骨细胞完全培养基100mL二甲基亚砜(Standard for GC,≥99.95%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.95%(GC)Dimethyl sulfoxide
PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)n-Decyl
alcohol
人肾上腺皮质细胞HACC琥珀酸二乙酯(standard
for GC,≥99.6%(GC))质量规格：standard
for GC,≥99.6%(GC)Diethyl succinate
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。