（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是环指蛋白87供应商的订购信息:
英文名称 Anti-RNF87
中文名称 环指蛋白87
别 名 Ring finger protein 87; RNF 87; TRIM4; Tripartite motif containing 4; Tripartite motif protein 4; Tripartite motif protein TRIM4;
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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环指蛋白87供应商 |
Anti-RNF87 |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 57 kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF89
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
小鼠星形胶质细胞(MA)(5×105)吗氯贝胺Moclobemide质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21吗氯贝胺(标准品)Moclobemide质量规格：>98%,标准品
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP 小鼠视网膜muller细胞完全培养基 100mL黄芪甲苷(标准品)Astragaloside
IV质量规格：>98%,分析标准品
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 Human黄芪甲苷Astragaloside IV质量规格：>98%,BR
CPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 那格列奈（标准品）Nateglinide质量规格：HPLC>99%,标准品
FCGR2A Others
Human 人 CD32a / FCGR2A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸巴龙霉素质量规格：≥675 U/mg,USP28Paromomycin Sulfate
人主动脉内皮细胞RNAHAEC miRNA5 μg硫酸巴龙霉素(标准品)质量规格：含量测定Paromomycin Sulfate
SK-N-SH细胞，神经母细胞瘤 人肺腺鳞癌细胞,NCI-H596细胞 人脑血管平滑肌细胞紫脲酸铵(ACS)质量规格：ACSMurexide
豚鼠源细胞甲基紫,龙胆紫质量规格：BSmethyl
violet
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人细胞裂解液 (阳性对照) 硝氮黄质量规格：INDNitrazine yellow
IFNAR1 Others
Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 春雷霉素;春日霉素; 克死霉质量规格：>60%,BRKasugamycin
小鼠前脂肪细胞完全培养基 100mL土拉霉素A，托拉菌素A,泰拉霉素质量规格：>95%Tulathromycin A
B16-F0-EGFP (稳定株)小鼠色素瘤细胞 B16-F0-EGFP (stable sain) of mouse
melanoma cells DMEM+10% FBS+200ug/ml G418拉米夫定质量规格：>98%,BR,USP可用于细胞培养Lamivudine
IL35 Protein Human 重组人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 标签)拉米夫定(标准品)质量规格：HPLC>99%,标准品Lamivudine
WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞) 5×106cells/瓶×2 C2C12, 小鼠肌原细胞盐酸三氟拉嗪质量规格：>99%Trifluoperazine dihydrochloride
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。