（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是原癌基因R-Ras抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-RRAS
中文名称 原癌基因R-Ras抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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原癌基因R-Ras抗体供应商 |
Anti-RRAS |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 G蛋白信号
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RRAS (152-190aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 Oncogene RRAS; p23; R Ras; Ras related Protein; Ras related protein R Ras; Ras-related protein R-Ras; related RAS viral (r ras) oncogene homolog; RRAS; RRAS_HUMAN.
SIGIRR Others
Human 人 SIGIRR / TIR8 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺噻唑钠盐Sulfathiazole
sodium salt质量规格：美国进口
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC匹格列酮-d4Pioglitazone-d4质量规格：美国进口
PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 羟基匹格列酮（M-Ⅶ）Hydroxy
Pioglitazone (M-VII)质量规格：美国进口
CL-0302PA319(人大肠癌细胞)5×106cells/瓶×25-去乙基5-羧基匹格列酮5-Desethyl 5-Carboxy Pioglitazone质量规格：美国进口
GC-1, 鼠精原细胞 swiss鼠胚胎成纤维细胞，3T3 swiss细胞 NCL-H548(人胰腺癌细胞)酮基匹格列酮（M-Ⅲ）Keto
Pioglitazone (M-III)质量规格：美国进口
MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸哌罗匹隆质量规格：>98%,BRPerospirone hydrochloride
SK-MEL-1, 人皮肤色素瘤细胞替拉扎明质量规格：>98%Tirapazamine(SR259075; Win59075; SR4233)
SIGLEC5 Others
Human 人 SIGLEC5 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC))质量规格：Standard for GC ,≥99.5%(GC)Methyl decanoate
人胚肺二倍体细胞;HEL-1甲酯(Standard
for GC,≥99.5%(GC))质量规格：Standard
for GC,≥99.5%(GC)Methyl laurate
HK-2细胞，人肾小管近段上皮细胞 负鼠肾细胞,OK细胞 CL-0389NCI-H1688(人典型小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC))质量规格：Standard for GC,≥98.0%(GC)Methyl palmitate
CM-H135人脉络膜微血管细胞完全培养基100mL五水合硫酸金雀花碱/硫酸鹰爪豆碱质量规格：≥97%,BR(-)-Sparteini
Sulfas
DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 辛弗林(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Synephrine
人脾脏内皮细胞HSEC泛昔洛韦（标准品）质量规格：HPLC≥99%,标准品Famciclovir
非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1
[COS1] 转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞，293细胞 QGY-7703(肝癌细胞)氟达拉滨1酸酯质量规格：>98.5%,USP,BRFludarabine Phosphate
人肺癌细胞;A549 [A-549]喷昔洛韦质量规格：>98%,BR,细胞培养级Penciclovir
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）原癌基因R-Ras抗体供应商的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。