产品名称： C1q肿瘤坏死因子相关蛋白2ELISA检测试剂盒说明书
英文名称：C1q And Tumor
Necrosis Factor Related Protein 2
灵敏度：0.1
性状：液体
存储：4℃保存6个月
运输方式：快递发货
产品仅用于科研有效期：6个月品
C1q肿瘤坏死因子相关蛋白2ELISA检测试剂盒说明书特点：灵敏性高，高效性，吸附均匀，吸附性好，回收利用率高，是一款可以让您放心选购的ELISA试剂盒产品。
使用范围：供科研实验使用，不得用于临床。
用途：用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
种属：人大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
组成：
1：预包被板: 96T/48T
2：酶标记抗体: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3：标准品: -6 0.5mL x 2
4：EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5：标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6：显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7：终止液: 1N硫酸 12mL x 1
8：浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1
样本处理及要求：
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
产品仅用于科研4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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