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荧光定量PCR仪的应用说明
⑴ 病原体检测
目前,采用
荧光定量PCR仪
技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类一些瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。
如:结核菌基因诊断的意义主要表现在:
a.区分TB与其它分枝杆菌;
b.检测TB耐药基因;
c.提高TB的阳性检出率。
⑵ 产前诊断
到目前为止,人们对遗传性物质改变引起的遗传性病症还无法根治,只能通过产前监测,减少病婴出生,以防止各类遗传性病症的发生,如为减少X连锁遗传病患儿的出生,从孕妇的外周血中分离胎儿DNA,用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法,易为孕妇所接受。
⑶ 疗效考核
对乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV) 定量分析显示:病毒量与某些疗效关系。HCV高水平表达,干扰素作用不敏感,而HCV低滴度,干扰素作用敏感;在拉米夫定过程中,HBV-DNA的血清含量曾有下降,随后若再度上升或超出以前水平,则提示病毒发生变异。如PCR技术在HBV检测中的应用及意义:
a.了解乙肝病毒在体内存在的数量。
b.是否复制。
c.是否传染,传染性有多强。
d.是否有必要服药。
e.肝功能异常改变是否由病毒引起。
f.判断病人是适合用哪类抗病毒。
g.判断疗效。
⑷ 肿瘤基因检测
尽管肿瘤发病的机理尚未清楚,但相关基因发生突变是致癌性转变的根本原因已被广泛接受。癌基因的表达增加和突变,在许多肿瘤早期就可以出现。实时荧光定量PCR不但能有效地检测到基因的突变,而且可以准确检测癌基因的表达量。目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性白血病WT1基因、肿瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、肿瘤相关的病毒基因等多种基因的表达检测。随着与肿瘤相关的新基因的不断发现,荧光定量PCR技术将会在肿瘤的研究中发挥更大的作用。
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