图1.使用QuickExtract™ RNA提取试剂盒提取HeLa细胞RNA,并通过终端RT-PCR扩增不同的14 kb区域。将每份样品所含有的105 HeLa细胞用100ul的QuickExtract RNA提取液涡旋裂解。将裂解产物使用MMLV Reverse Transcriptase 1st Strand cDNA Synthesis Kit
反转录,使用标准条件及引物进行反转录。用QuickExtract RNA体系针对P532的六对引物进行CDNA扩增泳道M,100 bp ladder; 第1泳道,13329至13892bp; 第2泳道,9406到10202bp; 泳道3,5194至5802bp; 泳道4,4191至4690bp; 第5道,2280至2676bp; 第6道,1029至1329bp。
图2.使用不同RNA提取试剂盒进行提取,比较RT-PCR产物的量。
裂解物根据制造商的说明制备并用作模板使用MMLV逆转录第1链cDNA合成试剂盒进行反转录,随后使用FailSafe™PCR系统进行PCR,体系中使用ALDOA基因的印务。产物通过2%琼脂糖凝胶电泳检测,用SYBR®染色。泳道M,100 bp ladder; 泳道1和2,QuickExtract™RNA提取试剂盒; 泳道3和4,所提供的试剂盒1; 泳道5和6,试剂盒2。