RiboMultiplier™ Sense-RNA Amplification Kit dsDNA Conversion Kit for RiboMultiplier™ sRNA
epicentre RMD80625 dsDNA Conversion Kit for RiboMultiplier™ sRNA 产品描述 应用 从10-500纳克总RNA产生正义链 RNA (sRNA). 扩增的sRNA可用于:
或者, 使用dsDNA Conversion Kit for RiboMultiplier™ 试剂盒将扩增的sRNA转成dsDNA用于:
RiboMultiplier™ Sense-RNA Amplification Kit试剂盒从总RNA样品的mRNA中扩增正义链RNA (Fig. 1). 从总RNA合成cDNA的第1条链,然后水解RNA;接下来使用含有末端标签序列(TTS)的寡聚核苷酸(3´末端封闭)和随机序列产生3´端含有已知序列标签的cDNA分子。双链T7启动子序列随后通过DNA合成加入到cDNA分子3´末端,经过体外转录,将原始信息放大10,000倍以上。整个反应单管进行,1小时内完成。
基因
转录本长度(nt)
3´/5´ 比例
sRNA
aRNA
GUSB
2,245
0.8
36.8
TUBA
1,706
0.9
223
ENSA
2,512
24.3
ACTB
1,792
0.3
73.5
TFRC
5,010
256
GAPDH
1,310
1.2
181
PKG1
2,338
0.4
H3F3A
1,117
1.6
121
ALB
2,215
1.5
9.8
HPRT
1,331
6.1
Table 1. RiboMultiplier™ sRNA与其它试剂盒扩增的RNA的3´/5´ 比例. 使用RiboMultiplier™ sRNA随机引物和其它试剂盒的T7-dT aRNA合成的cDNA用于定量PCR比较。一般而言,3´/5´比例在1.0左右说明了更小的3´偏好性。.
初始总RNA量
RiboMultiplier™ sRNA试剂盒的平均产量
通用的人类参考RNA
HeLa 总RNAa
10 ng
8.2 µg
7.3 µg
25 ng
23.4 µg
17.5 µg
100 ng
86.7 µg
71.8 µg