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产品资料

epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template

epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template
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  • 产品名称:epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template
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简单介绍
北京中北林格供应epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template,中北林格是epicentre总代理,提供epicentre产品货号报价查询。其他包括lucigen总代理,cellscript总代理,Biosearch technologies总代理,epicentre总代理,illumina总代理,ICLLAB总代理,ImmunoReagents总代理。epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template
产品描述
epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template
产品简介:北京中北林格供应epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template,中北林格是epicentre总代理,提供epicentre产品货号报价查询。其他包括lucigen总代理,cellscript总代理,Biosearch technologies总代理,epicentre总代理,illumina总代理,ICLLAB总代理,ImmunoReagents总代理。</p

产品名称:Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template
货号:KN411100
规格:100 μl
存储温度:-20℃
品牌:lucigen / epicentre</p>
供应商:中北林格</p>
产地:us</p>
发货地:北京</p

epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template 产品描述

应用领域

  • DNA依赖性RNAP活性测定。
  • 筛选化合物的RNAP抑制剂活性。

Kool™通用RNA聚合酶模板是小的(28至150个核苷酸)圆形ssDNA分子。正如在埃里克·库尔(Eric Kool)博士的实验室中观察到的那样,这些DNA纳米圈可以通过滚环机制在体外被多种DNA依赖性RNA聚合酶(RNAP)有效地转录1-3从纳米圆模板进行滚圆转录不需要标准启动子序列或引物。junRNAP在没有sigma因子的情况下转录Kool模板,从而可以研究RNA聚合机制和抑制剂对核心RNAP的作用。

Kool NC-45™RNAP活性和抑制剂筛选试剂盒*使用Kool NC-45模板(一种45个核苷酸的环状ssDNA)来筛选细jun聚合酶对滚环转录的抑制剂。1,2可以筛选化合物对大肠杆菌 RNAP的抑制作用,也可以在用户提供的RNAP上分析抑制剂。滚环转录的高产物-模板比值除了可以掺入放射性核苷酸外,还可以使用多种检测方法(图1)。使用荧光染料或分子信标可以进行终点或实时监测。3 Kool NC-45筛选试剂盒使用一种与RNA结合的染料来实时检测RNA活性。


好处

  • 一种快速,简单且灵敏的测定RNAP的方法。
  • 无需启动子序列或无需了解启动子序列即可测定RNAP活性。
  • 产品与模板的比例非常高。
  • 提供了无需后处理即可实时,快速测定RNAP活性的简便方法。
  • 易于多重化和自动化,可高通量筛选RNAP酶或RNAP抑制剂。

epicentre KN411100 Kool™ NC-45™ Universal RNA Polymerase Template 图例说明

图1. 在存在和不存在抑制剂的情况下,大肠杆菌 RNAP 实时检测滚环转录将两个皮摩尔的Kool™NC-45™模板与0.5单位的大肠杆菌 RNAP核心酶,0.5 mM NTP和上述抑制剂在1X反应缓冲液中于37°C孵育添加荧光染料,并在iCycler iQ™实时PCR检测系统(Bio-Rad)中监测反应。可以检测到已知的xi菌RNA聚合酶抑制剂rifampicin的强烈抑制作用,以及Tagetin™抑制剂的部分抑制作用,而真核RNA聚合酶II的抑制剂α-amanitin没有作用。

图2. Kool™Nanocircle-45™模板的滚环转录。将1.5 pmole的Kool™Nanocircle-45模板在1x含0.5 mM NTP和以下RNAP的反应缓冲液中于37°C孵育1小时:1:大肠杆菌 RNAP全酶;1 2:大肠杆菌 RNAP核心酶;3:金黄色葡萄球菌 RNAP;4:Thermus RNAP;5:T7 RNAP;6:T3 RNAP;7:SP6 RNAP;8:MiniV™RNAP。琼脂糖凝胶用SYBR®Gold Dye(Molecular Probes)染色。

References

  1. Daubendiek S.L. and Kool, E.T. (1997) Nature Biotechnol. 15, 273.
  2. Ohmichi, T. et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 54.
  3. Marras, S.A. et al. (2004) Nucl. Acids Res. 32, e72.

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