epicentre AP49100 APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase 产品描述 应用说明
APex™ Heat-Labile Alkaline Phosphatase是一种创xin的酶制剂，活性超过其它的耐热碱性磷酸酶。该酶通过重组获得，具有高纯度并不含核酸酶污染。APex Alkaline Phosphatase批次十分稳定，可以从所有类型的DNA末端（5´悬浮，平端，5´凹陷端，RNA末端）去除5´-磷酸基。70°C ，加热5分钟可灭活该酶。
参数说明
APex Phosphatase可以直接加入到大部分的限制性内切酶缓冲液中，在高至50°C 、不同盐浓度（如1 M Na+, NH4+, K+, Cl-, or OAc-)、10% Triton® X-100等条件下同样具有高活性。 去除DNA, RNA或核苷的5´-磷酸化，只需要将底物与APex Phosphatase在37°C孵育10分钟即可。相同的反应条件也适用于所有类型（包括5´凹陷端）的DNA末端. 活力单位定义: 1微升的APex Heat-Labile Alkaline Phosphatase能够在37°C，10分钟将1 µg的Hind III，Hinc II或Pst I消化的pUC19载体DNA脱磷酸。 储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 mM醋酸锌, 10 mM MgCl2, 0.1 M NaCl和0.1% Triton® X-100. 10X反应缓冲液: 330 mM Tris-acetate (pH 7.5), 660 mM醋酸钾, 100 mM 醋酸镁和5.0 mM DTT. 质量控制: 基于功能检测满足Epicentre的克隆标准，去磷酸化后95%的DNA不能自连。'不含核酸外切、内切酶活性和RNase活性.
列表说明
Table 1. 限制性内切酶悬浮端检测
5´-悬浮
5´-(4-base) 悬浮:
Hind III, EcoR I
5´-(3-base) 悬浮:
EcoO109 I
5´-(2-base) 悬浮:
Nde I
平端: Sma I, Ssp I
5´-缩进
3´-(4-base) 悬浮:
Sph I, Sac I, Pst I
3´-(3-base) 悬浮:
AlwN I
3´-(1-base) 悬浮:
Ahd I