epicentre AAU5202 2.5 μmoles Aminoallyl-UTP
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产品名称:Aminoallyl-UTP
货号:AAU5202
规格:2.5 μmoles @ 50 mM
存储温度:-20℃
epicentre AAU5202 2.5 μmoles Aminoallyl-UTP 产品描述
氨基烯丙基-UTP [5-(3-aminoallyl-)UTP; AA-UTP]提供了一个经济有效的替代方案，当通过体外转录制备非放射性的RNA探针时可直接结合标记的NTP。该产品主要用于基因芯片的分析、原位杂交、或杂交的应用。AA-UTP容易通过T7 RNA聚合酶很容易整合进RNA转录物，制备胺基烯丙基-RNA。胺基烯丙基-RNA随后可以结合胺活性生物素。例如生物素-XX-NHS,或荧光染料，产生标记的RNA。
胺基烯丙基-UTP可提供便利的50-mM的溶液。
epicentre AAU5202 2.5 μmoles Aminoallyl-UTP 之 lucigen epicentre A32250 250U
应用说明：
连接扩增（连接酶链反应，LCR）1-7
重复扩增检测（RED）。7
多位点同时突变。8,9
其他连接为基础的检测方法。
Ampligase® Thermostable DNA Ligase催化NAD-依赖的双链DNA的3'-羟基化和5'-磷酸化末端的连接反应，对热稳定。该酶来源于嗜热**，与传统DNA连接酶相比，该酶具有更高的活性和稳定性。65°C时该酶半衰期为48小时，95°C时在1小时以上。
Ampligase DNA Ligase在500个以上热循环后（16个小时循环）.10 这种高稳定性保证了极高的杂交严谨性和连接特异性。Ampligase DNA Ligase无平端DNA连接活性，无RNA或RNA:DNA杂交体连接活性。
优势
高热稳定性，保证可以使用更严谨的杂交温度。
高特异性和严谨性能够敏感检测SNPs.11
活力单位定义: 1个活力单位的Ampligase DNA Ligase指在1X Ampligase Reaction缓冲液中，45°C条件下1分钟能够催化1 µg的lambda DNA中的50% cos位点发生连接。
Note:一个单位的Ampligase DNA Ligase等价于至少15个别处定义的 "cohesive end units"或 "nick ligation units"。4
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100。
Ampligase 10X反应缓冲液: 200 mM Tris-HCl (pH 8.3), 250 mM KCl, 100 mM MgCl2, 5 mM NAD和0.1% Triton® X-100。
质量控制: Ampligase Thermostable DNA Ligase的活性通过在45°C条件下连接Sma I消化后产生的平端噬菌体DNA进行检测；电泳检测连接只发生在cos位点。Ampligase DNA Ligase不含DNA外切、内切核酸酶和RNA酶活性。
epicentre AAU5202 2.5 μmoles Aminoallyl-UTP 之 lucigen epicentre A32250 250U 图例说明
Figure 2. Ligation Amplification using Ampligase? DNA Ligase. Oligonucleotides A, B, C, and D from Figure 1 (25 pmoles each) were incubated as in Figure 1 with 5 units of Ampligase DNA Ligase in 25 ?l of 1X Ampligase Reaction Buffer, with (+) or without (-) 0.25 pmole DNA template. The reactions were cycled 40 times for 1 minute at 94°C and 2 minutes at 65°C, then separated by electrophoresis and visualized with ethidium bromide. In the presence of template DNA, the target sequence is amplified by formation of the ligation products A+B and C+D.
References
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