DisplaceAce™ DNA Polymerase D090710K 10,000 U 产品描述 应用
DisplaceAce™ DNA 聚合酶是一种来自嗜热菌的重组DNA聚合酶,通过截短全长酶去除了5'→3'核酸外切酶活性。与芽孢杆菌DNA聚合酶类似,具有很强的链置换活性。以DNA为模板的zui适反应温度为65℃;该酶同样具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性。酶可以通过孵育在80℃孵育20分钟进行灭活。如果希望热变性DNA底物(>75°C),那么酶应该在热变性后加入,以保证酶活性。 活力单位定义:一个活力单位指标准条件下,65°C孵育30分钟,将10 nmol的dNTPs转换成不溶于酸的物质所需的酶量。 10X反应缓冲液: 200 mMTris-HCl (pH 8.5) and 50 mM MgCl2. 储存缓冲液: 50 mMTris-HCl (pH 7.5)含50% glycerol, 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, and 0.1% Triton® X-100. 质量控制: DisplaceAce DNA Polymerase通过使用不同的DNA模板来检测活性;不含RNase、无外切和内切核酸酶活性。
应用领域
所述HyperMu™<R6Kγ ORI / KAN-1> TNP转座™是含有R6KγHyperMu转座和一个HyperMu座子之间的稳定的复合物 的大肠杆菌 的复制和卡那霉素可选择的标记物的条件原点。可将转座体电穿孔到活的 大肠杆菌 细胞中,并在细胞内被Mg 2+激活,然后将HyperMu转座子随机插入宿主的基因组DNA中。*在卡那霉素平板上选择转座子插入克隆或通过筛选所需的克隆基因“敲除”或基因功能丧失。
转座子插入位点可以使用提供的与插入的HyperMu转座子末端同源的引物直接测序。或者,可以将插入位点及其侧翼DNA“拯救”为质粒,然后测序。
注意: EPICENTER建议研究人员考虑使用EZ-Tn5™转运体试剂盒来代替HyperMu转运体试剂盒,或者除此以外还使用EZ-Tn5™转运体试剂盒。EZ-Tn5转座体通常 比HyperMu转座体产生10-100倍 的体内插入。
好处
*使用Transposome™复合物 在体内 插入转座子,包括但不限于HyperMu™和EZ-Tn5™Transposome™复合物,已获得美国**6,159,736及其相关**和**申请的独jia许可前往EPICENTRE。