本生生物教您如何选购高质量胎牛血清?
市场上的胎牛血清种类繁多,很多科研工作者,特别是刚接触细胞培养的人,都是难以分辨胎牛血清质量的优劣。选购胎牛血清请注意什么,一下便是天津本生生物就这一要求的详解不妨来看看:
**、外观
拿到胎牛血清,*先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要
1、颜色
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。
进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
2、沉淀
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。
国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
3、澄清度
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
**、主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:
1、内**
标准为不高于5EU/ml。内**是**破碎后细胞壁的成分,因此内**含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。
2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。
3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。
4、pH
国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。
5、微生物
包括**、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,**、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能**。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底**,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、**球蛋白
国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。**球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。
7、其它
不管是国产还是进口血清,都是不测***的(无四环素胎牛血**外)。国外,***的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含***或含量极低;国内,***的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。
注:本生生物提示仅供参考!