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人脐静脉内皮细胞的细胞接种培养
人脐静脉内皮细胞
在进行血管内皮细胞实验时,通常选用的细胞模型为人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,简称HUVECs)。而不是直接采用静脉血管内皮细胞或动脉血管内皮细胞。原因是脐静脉内皮细胞具有干细胞的潜能,理论上可以传代50-60次。
1、细胞接种:
(1)、包被液:用去离水配制0.5%明胶溶液,过滤除菌。
(2)、培养瓶包被:取2-4个T25培养瓶,每个培养瓶加2-3ml0.5%明胶溶液,摇匀使包被液布满培养瓶底面,置37℃2小时或放置过夜。
(3)、接种细胞:接种前吸净包被液,按2500-5000个细胞/cm接种细胞(1支5×10个细胞可接种2-4个培养瓶),每瓶加培养液3-5ml,摇匀后置37℃5%CO2培养箱内培养24小时,此时细胞已完全贴壁,更换培养液后继续在37℃5%CO2培养箱内培养。
(4)、扩大培养:一般每周更换培养液2次,至细胞长至覆盖培养面的70-80%可进行传代或冻存。
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