神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用
【神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用中的实验目的】
通过本实验的观察,加深理解神经-肌肉接头兴奋的传递过程。
【神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用中的实验原理】
神经-肌肉接头处是由接头前膜、接头后膜和它们之间的接头间隙三部分组成。运动神经纤维到达骨骼肌细胞时,其末梢失去髓鞘,嵌入肌细胞膜。当动作电位到达神经末梢时,接头前膜的电压门控Ca2+离子通道打开,可引起大量Ca2+由胞外进入。接头前膜将乙酰胆碱分子释放到接头间隙。乙酰胆碱通过接头间隙到达接头后膜(终板膜)时,立即与接头后膜上乙酰胆碱受体(N受体)通道蛋白质结合,使通道开放,允许Na+、K+等通过,但以N a+内流为主,因而引起终板膜静息电位减小,即产生终板膜的去极化,称为终板电位。一次终析电位一般都大于相邻肌膜阈电位的3~4倍,所以它很容易引起邻近肌细胞膜爆发动作电位,也就是引起骨骼肌细胞的兴奋。本实验既要引导神经的动作电位,又要记录肌肉的收缩,从而证明神经冲动通过肌接头的化学传递引起肌肉的收缩。
【神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用中的实验对象】
蟾蜍。
【神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用中的实验器材】
蛙类解剖手术器材、蛙钉、林格液、箭毒、腓肠肌固定屏蔽盒、微调固定器、张力换能���和ZL-620生物信号采集处理系统等。
【神经肌肉接头兴奋的传递和阻滞在ZL-620医学信号采集处理系统的应用中的方法和步骤】
1.
制备蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本(标本两端均扎线),浸入林格液备用(制备方法见“实验一”)。
2.
实验装置
(1) 将离体坐骨神经腓肠肌标本固定在屏蔽盒中。
(2) 腓肠肌的跟腱结扎线固定在张力换能器上。
(3) 坐骨神经放在刺激、接地、引导电极上,保持神经与电极接触良好。刺激电极与引导电极间的接地电极接地,引导电极引导神经干动作电位。
(4) 打开计算机,启动ZL-620生理信号采集处理系统。点击ZL-620菜单“实验/常用生理学实验”,选择“神经-肌接头兴奋的传递和阻滞”。设置ZL-620放大器、采样和刺激器参数(表2-6-1),刺激模式也可采用单刺激、串刺激。
表2-6-1 ZL-620放大器、采样和刺激器参数表
采样参数
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刺激器参数
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显示方式
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示波器或记录仪
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刺激模式
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自动幅度调节
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采样间隔
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20us
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主周期
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5s
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X轴显示压缩比
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20~100:1
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波宽
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0.1ms
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通道
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通道2
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通道3
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通道4
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幅度
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0.5V
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DC/AC
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AC
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DC
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记录刺激标记
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间隔
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50ms
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处理名称
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动作电位
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张力
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刺激标记
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脉冲数
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1
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放大倍数
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200~1000
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50~100
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5~50
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延时
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1ms
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Y轴压缩比
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4:1
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4:1
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64:1
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周期数
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连续
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3.
实验观察
(1) 观察腓肠肌的收缩活动:用2~5S的主周期刺激坐骨神经,观察腓肠肌的单收缩曲线、神经干动作电位波形和刺激标记以及三者之间的时间关系,计算从动作电位起点到肌肉收缩起点的时差。
(2) N受体阻断剂的作用:在腓肠肌的两端给予肌内注射箭毒各0.1ml(1mg)。并用浸泡有箭毒的薄层棉花盖于腓肠肌上,每隔60s刺激坐骨神经一次,观察多少分钟后只出现神经干动作电位,而不出现腓肠肌收缩,为什么?
【实验结果】
将观察到的结果打印输出或描画上报告上。
【思考题】
N受体阻断剂起作用后,有无办法又使腓肠肌收缩?