动脉血压主要受神经、体液调节。支配心血管的神经主要为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管神经。心交感神经兴奋,末梢释放去甲肾上腺素,作用于心肌细胞膜上的β1受体,使心率加快,传导速度加快,收缩力增强,导致心输出量增加,动脉血压升高;心迷走神经兴奋,末梢释放乙酰胆碱,作用于心肌细胞上M受体,使心率减慢,心房肌收缩力减弱,导致心输出量减少,动脉血压降低;交感缩血管神经兴奋,末梢释放去甲肾上腺素,作用于血管平滑肌细胞膜上的α受体,使血管收缩,外周阻力增加,动脉血压升高。神经系统对动脉血压的调节是通过各种反射来进行的,其中*重要的是压力感受性反射,即降压反射。该反射的感受器位于颈动脉窦和主动脉弓,传入神经为主动脉神经与窦神经,家兔的主动脉神经在解剖上为独立的一条,称为降压神经,电刺激该神经可观察降压反射的活动。此外,动脉血压还受体液因素的调节,静脉注射某些受体激动剂或拟似药,可观察它们对动脉血压的影响。
由于ZL-620A集成化信息化信号采集处理系统能够观察到各种生物机体内或离体器官中探测到的生物电信号以及张力、压力、温度等生物非电信号的波形,从而对生物肌体在不同的生理或药理实验条件下所发生的机能变化加以记录与分析,将动脉导管插入颈总动脉的向心端,可以测得动脉血压,该压力的变化经血压换能器转换成电信号再输入ZL-620A集成化信息化信号采集处理系统,在计算机屏幕上显示动脉血压的曲线,达到学习直接测量动脉血压的实验方法,观察家兔颈迷走神经、交感神经和降压神经以及**对动脉血压的影响的目的。
【实验对象】
兔。
【实验器材】
哺乳类动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、动脉导管、ZL-620A集成化信息化信号采集处理系统、血压换能器、手术灯、铁支架、保护电极、有色丝线、注射器、20%氨基甲酸乙酯溶液、1000U/ml肝素溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000去甲肾上腺素溶液。
【方法和步骤】
1.准备检压系统 将动脉导管与血压换能器相连,通过三通开关用肝素溶液充灌血压换能器和动脉导管,排尽血压换能器与动脉导管中的气泡,然后关闭三通开关备用。若血压换能器没有定标,要对血压换能器定标。
2.动物实验准备
(1)称重、麻醉与固定:动物称重,按5ml/kg的剂量于耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液进行麻醉。将动物背位(仰卧)固定于兔手术台上。
(2)手术:剪去颈前部兔毛,沿正中线切开皮肤5~7cm,用止血钳纵向分离皮下组织和肌层,暴露气管后**管插管术。然后,将切口边缘的皮肤及其下方的肌肉组织向两侧拉开,即可在气管两侧见到与气管平等的左、右颈总动脉鞘。用玻璃分针分离出右侧鞘内的降压神经(*细)、迷走神经(*粗)和颈总动脉(2~3cm长),分别在下面穿不同的有色丝线;然后分离出左侧颈总动脉约3cm长,穿双线以备动脉插管时用。
(3)动脉插管:将左侧颈总动脉远心端用线结扎,近心端用动脉夹夹闭,两者距离约需2cm。用眼科剪在结扎线下方0.5cm处的动脉壁上向心脏方向剪一斜切口,切口约为管径的一半。然后将准备好的动脉导管由切口处向心脏方向插入动脉内。用已穿好的备用线扎紧血管和已插入的动脉导管。利用远心端结扎缄将动脉导管再次结扎固定,使动脉导管与动脉保持在同一直线上,并可防止插管滑脱。动脉导管另一端为血压换能器,血压换能器与动物心脏保持在同一水平。
(4)注射肝素:在耳缘静脉按1000U/kg剂量注射肝素,并等肝素在家兔体内血液中混合均匀后进行下面的实验。
3.实验装置
(1)将血压换能器的输入插头与ZL-620A集成化信息化信号采集处理系统的信号放大器输入盒的2通道相连。将刺激电极输入端与刺激输出口相连,将刺激电极输出端与保护电极相连。
(2)调零、压力定标和制压:实验前,一般已调整好测量系统,实验过程中,勿轻意改动。若重新调零和压力定标,请参照“生理学实验总论”。
(3)打开计算机,启动ZL-620A集成化信息化信号采集处理系统。点击ZL-620A菜单“实验/常用生理学实验”,选择“动脉血压记录”,设置ZL-620A放大器、采样和刺激器参数(表1)。
4.实验观察
(1)记录静息状态下家兔动脉血压曲线,观察正常血压波动曲线及心率、血压参数。
**波(心搏波):由于心室舒缩所引起的血压波动。
二级波(呼吸波):由于呼吸运动所引起的血压波动。
三级波:常不出现,可能由于血管运动**紧张性周期性变化所致。
(2)用动脉夹夹闭右颈总动脉,阻断血流15s,观察血压和心率的变化。
(3)将右侧降压神经置于保护电极上,点击刺激按钮,观察刺激完整降压神经时血压和心率的变化。
(4)用两根丝线分别结扎降压神经中部的两处,并在两结扎之间将神经剪断,分别电刺激切断后的神经**端和外周端,观察血压和心率的变化。
(5)结扎右侧迷走神经,在结扎处头端剪断该神经,然后用保护电极刺激迷走神经的外周端,观察血压和心率的变化。
(6)于耳缘静脉注射1:10 000肾上腺素溶液或1:10 000去甲肾上腺素溶液0.3ml,观察血压和心率的变化。
【实验结果】
1. 统计全班各组的结果, 以平均值±标准差表示,比较各种处理前后血压和心率的变化,并用直方图表示。
2. 将实验结果打印输出或描绘于报告上。
【注意事项】
1. 麻醉剂剂量不能过量,注射不宜过快,麻醉剂应在3min左右注射完毕。
2. 室温低时打开手术台下电灯给动物保温,防止麻醉后体温下降。
3. 夹闭颈总动脉和刺激神经,均要避免过度牵拉,应尽可能在原位置上轻柔地进行。
4. 各项观察项目在前一项目实验恢复的基础上进行,每项观察项目的记录必须有前后对照。
【思考题】
1. 插动脉导管前为什么要结扎头端血管?为什么动脉的近心端也要用动脉夹夹住?
2. 动物为什么要注射肝素?你认为是手术前注射还是手术完毕后注射好?
3. 正常血压波动的情况如何?何以会有各种波动?心脏每搏动一次是否血压应波动一次?能否从所记录曲线上看出来?
4. 未插管一侧的颈总动脉短时夹闭对全身的血压和心率有何影响?为什么?假使夹闭部位在颈总动脉窦以上,影响是否相同?
5. 刺激降压神经的**端和外周端对血压和心率的影响有何不同?为什么?
6. 迷走神经为何要切断后再刺激外周端?结果如何?为什么?
7. 注射去甲肾上腺素后,血压上升,此时心率会有什么变化?为什么?
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