ELISA试剂盒中蕴含的酶

日期：2024-12-04 02:50

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摘要：（1）HRP：HRP是一种糖蛋白，含糖量约18％，分子量为44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。ELISA试剂盒HRP是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合形成一种卟啉蛋白质。主酶为五色糖蛋白，在275nm波长处有zui高吸收峰；辅基是深棕色的含铁卟啉环，是酶的活性基团，在403nm波长处有zui高吸收峰。HRP的纯度用纯度值（reinhartzahl，RZ）表示，RZ＝A403nm／A275nm，即403nm的吸光度与280nm的吸光度之比，高纯度HRP的RZ值应≥3．0。ELISA试剂盒HRP质量的另一重要指标是酶活力，以单位（unit，U）表示。用于标记的HRP比活性应≥25...

（1）HRP：HRP是一种糖蛋白，含糖量约18％，分子量为44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。ELISA试剂盒HRP是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合形成一种卟啉蛋白质。主酶为五色糖蛋白，在275nm波长处有zui高吸收峰；辅基是深棕色的含铁卟啉环，是酶的活性基团，在403nm波长处有zui高吸收峰。HRP的纯度用纯度值（reinhartzahl，RZ）表示，RZ＝A403nm／A275nm，即403nm的吸光度与280nm的吸光度之比，高纯度HRP的RZ值应≥3．0。ELISA试剂盒HRP质量的另一重要指标是酶活力，以单位（unit，U）表示。用于标记的HRP比活性应≥250U／mg。HRP的作用底物为H202，催化下列反应：DH2+H202 —【HRP】—》D+2H2O

（2）ALP：是一种磷酸酯的水解酶，用做示踪酶的ALP活性应在l 000U／mg以上。ALP常用的底物为对硝基苯磷酸盐（PNP），降解产物为黄色的对硝基酚。经NaOH终止酶反应后，颜色维持比较稳定。

在ELISA试剂盒中酶作用于底物后生成有色物质、荧光物质或导致化学发光，分别可用分光光度计、荧光光度计测量及照度计测量。荧光和化学发光测定的敏感度均高于比色测定，标准曲线的线性范围亦较比色反应宽，测定效果优于常用的比色ELISA试剂盒。

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