标准血红蛋白参考液操作方法很关键

标准血红蛋白参考液操作方法很关键

[包装规格]：10ml×8支/盒,根据血红蛋白浓度不同，而将氰化高铁血红蛋白标准液分别为50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L及200gHb/L

标准血红蛋白参考液操作方
1.光电比色计标准曲线绘制法:
1.1标准液每套四支,其浓度分别为50gHb/L、100gHb/L、150gHb/L、200gHb/L
1.2用50倍稀释后的文齐氏液或蒸馏水作空白管，在540nm波长处用分光光度计或绿色滤光片的光电比色计进行测量，调吸光度（A值）为“0”，再测量标准液管，每管测量3次吸光度（A值），取均值。纵坐标为吸光度（A值），横坐标为Hb克数（g Hb/L血液），在标准计算纸上绘制标准曲线。
1.3用标定过的吸管准确吸取20μl血液，放入盛有5ml文齐氏液的试管中吸洗三次混匀（251倍稀释），5分钟后在同一比色计上测定血样品管的吸光度值（A值），从标准曲线查出A值相对应血样品的血红蛋白克数（g Hb/L）。
2. 血红蛋白计的校正法:
2.1 用50倍稀释后的文齐氏液或蒸馏水作空白管，将血红蛋白计的读数调为“0”值。
2.2 取出空白管，换上单浓度血红蛋白标准管（100gHb/L、130gHb/L、
150gHb/L），旋转按钮使血红蛋白计的读数与标准管克数一致。按1.3项方法制备血样品管并混匀，5分钟后在同一血红蛋白计上测定，显示克数为该血样品的实际克数（g Hb/L）。

组成结构人体内的血红蛋白由四个亚基构成，分别为两个α亚基和两个β亚基，在与人体环境相似的电解质溶液中血红蛋白的四个亚基可以自动组装成α2β2的形态。血红蛋白的每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成，肽链在生理条件下会盘绕折叠成球形，把血红素分子抱在里面，这条肽链盘绕成的球形结构又被称为珠蛋白。血红素分子是一个具有卟啉结构的小分子，在卟啉分子中心，由卟啉中四个吡咯环上的氮原子与一个亚铁离子配位结合，珠蛋白肽链中第8位的一个组氨酸残基中的吲哚侧链上的氮原子从卟啉分子平面的上方与亚铁离子配位结合，当血红蛋白不与氧结合的时候，有一个水分子从卟啉环下方与亚铁离子配位结合，而当血红蛋白载氧的时候，就由氧分子顶替水的位置。