ELISA实验过程中处理血清样本的注意事项

日期：2024-11-21 23:25

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摘要：在ELISA实验中，血清是极为常见的样本，那么在ELISA实验过程中处理血清样本时有哪些注意事项呢？今天就跟大家来介绍一下。 1、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清样本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。 2、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免菌体污染，一则菌体的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些菌体的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。 3、血清样本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。 4、冰冻保存的血清样本须注意避免因停电等造成的反复冻融。样本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融样本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。 5、样本在保存中如出现菌体污染所致的混浊或絮状物时，应

在ELISA实验中，血清是极为常见的样本，那么在ELISA实验过程中处理血清样本时有哪些注意事项呢？今天就跟大家来介绍一下。

1、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清样本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。

2、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免菌体污染，一则菌体的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些菌体的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

3、血清样本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。

4、冰冻保存的血清样本须注意避免因停电等造成的反复冻融。样本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融样本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。

5、样本在保存中如出现菌体污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。

以上就是ELISA实验过程中处理血清样本的注意事项，处理好实验样本是能顺利进行实验的前提，所以大家在一定要多加注意。

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