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ELISA检测试剂盒添加的步骤
日期:2024-11-11 20:47
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摘要:
ELISA检测试剂盒的原理基于特异性抗体与待检测分子之间的特异性结合反应。一般而言,ELISA包括固相抗体的固定、样品的加入、特异性抗体的结合、酶标记抗体的结合以及底物的添加等步骤。具体步骤如下:
1. 固相抗体的固定:在检测板上涂覆特异性抗体。这些抗体通常被固定在多孔板表面,如96孔板。固相抗体的选择取决于待测分子的特异性。
2. 样品的加入:将待测样品加入涂有固相抗体的检测孔中,让样品中的目标分子与固相抗体结合。
3. 特异性抗体的结合:经过洗涤步骤后,特异性抗体(标记抗体)与已结合在固相上的目标分子结合。特异性抗体通常与酶标记结合,以便后续检测步骤中的酶活性测量。
4. 酶标记抗体的结合:经过洗涤步骤后,酶标记抗体与特异性抗体结合,形成特异性抗体-酶标记抗体复合物。该复合物具有较强的酶活性。
5. 底物的添加:加入适当的底物,使酶标记的特异性抗体产生可测量的信号。底物的选择取决于所使用的酶。
通过测量底物的反应产物,可以确定目标分子的存在和浓度。ELISA检测试剂盒的原理灵敏度高、特异性强,因此成为许多生物学实验研究和临床诊断中的优选方法。