ELISA过程中的洗板

ELISA实验原理简单，步骤少，流程短，试剂盒操作相对简便，实验小白也能轻松上手。然而，实验上手虽快，想要得到可靠的实验结果，却并不那么容易。
    洗板在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却是决定试验成败的关键。ELISA就是靠洗板来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，通过洗板以清洗残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗板时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。在ELISA操作中，洗涤是主要的关键技术，应严格按要求洗涤。洗板如不彻底，有酶结合物的非特异性吸附，将使空白值升高。另外，在间接法中如血清标本内的非特异性IgG吸附在固相上而未被洗净，也将与酶标记抗体作用而产生干扰。
1.各厂家的洗液是根据各自试剂的条件配制的，因此采用不配套的洗液常会得到不正常的反应结果，包括本底升高，所以不同厂家的洗液不应混用。
 2. 洗液应按规定的倍数稀释使用。试剂盒提供的洗液是浓缩的，过多稀释洗液，会影响洗液的效果，而使反应的本底升高。反之造成假阴性。
 3. 稀释洗液的水应该是新鲜的蒸馏水，电导率小于1.5us/cm。如果水中含有过多的钙、镁离子，这些离子会占用表面活性剂，使试验本底增高。
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