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试剂盒售后解析ELISA测定结果
日期:2024-11-22 00:11
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摘要:
今早,我公司吴收到由沈阳农业大学朱老师发来的会话。朱老师在2020年连续购买了6次ELISA试剂盒,上周,朱老师我司技术说想要试试自己配的试剂盒,看看检测效果。在朱老师给吴的会话中表示:“我的这个检测结果不理想,不知道是哪里出了问题。帮我看下是什么原因可以吗?”我公司试剂盒售后客服吴说可以,并为朱老师安排技术解析Elisa测定结果。
朱老师的主要问题是:我自己合成8个氨基酸的抗原短肽,和BSA耦连后免疫动物,1个月后用ELISA测定血清中针对抗原短肽的抗体滴度,具体步骤:用碳酸缓冲液溶解抗原短肽后...
今早,我公司吴收到由沈阳农业大学朱老师发来的会话。朱老师在2020年连续购买了6次ELISA试剂盒,上周,朱老师我司技术说想要试试自己配的试剂盒,看看检测效果。在朱老师给吴的会话中表示:“我的这个检测结果不理想,不知道是哪里出了问题。帮我看下是什么原因可以吗?”我公司试剂盒售后客服吴说可以,并为朱老师安排技术解析Elisa测定结果。
朱老师的主要问题是:我自己合成8个氨基酸的抗原短肽,和BSA耦连后免疫动物,1个月后用ELISA测定血清中针对抗原短肽的抗体滴度,具体步骤:用碳酸缓冲液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小时,再用1%OVA37度封闭2小时,洗板3次。待测血清用10%小牛血清倍比稀释,37度温育1小时,洗板3次,加入二抗,37度温育40分钟,洗板3次,加TMB显色,结果比较诡异,阴性对照也显色了,且OD值和阳性差别不大。是什么原因呢?是洗板的问题吗?
十分钟后,技术员给朱老师去解答。可以根据这几个方面分析:
1.洗板是否串孔,如串孔的话可能造成污染;你一抗、二抗每次洗板时洗5遍以上。
2.封闭液的问题,你说阴性对照也显色了,那zui主要的问题应该是封闭,应重新考虑用OVA封闭是否适合,如果OVA封闭效果不好的话可以选择其他的封闭液。封闭液的选择园子里有很多相关的帖,你搜一下看看。
3.建议ELISA试剂盒包被在37度两小时,这样的效果可能会好一些。