ELISA实验的样本为什么都要进行稀释工作

日期：2024-12-04 16:29

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摘要：ELISA试剂盒实验稀释血清的进程：先把蛋白稀释必定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体判定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用必定稀释度的阳性参看血清和阴性参看血清进行孵育后洗刷，再加酶结合物进行反应，经孵育洗刷后，加底物溶液显色，中止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参看血清和阴性参看血清的O.D值有明显不同。 ELISA试剂盒很多人都是知道的...

ELISA试剂盒实验稀释血清的进程：
先把蛋白稀释必定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体判定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用必定稀释度的阳性参看血清和阴性参看血清进行孵育后洗刷，再加酶结合物进行反应，经孵育洗刷后，加底物溶液显色，中止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参看血清和阴性参看血清的O.D值有明显不同。
ELISA试剂盒很多人都是知道的，那你知道吗，其实每一份ELISA试剂盒里边都有着一份说明书，里边介绍了样本稀释的份额。这时候就有很多人就要问了，为什么ELISA实验的样本都要进行稀释作业？
在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释？有两个原因：
1）比赛按捺比较明显，应稀释比赛物；
2）以下降非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。
血清稀释用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，当然假设你嫌费事我觉得用生理盐水代替PBS也不大。不管你是用直接比赛仍是直接比赛，血清的稀释倍数必定要事前判定，但也不必一点点，你做一个预实验即可，选择OD在1.0左右的稀释倍数，即你的比赛ELISA中阴性孔OD在1.0，这样作出来的曲线比较灵敏。

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