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细胞的主要用途和优点
日期:2024-11-23 18:37
浏览次数:218
摘要:细胞的主要用途和优点
主要用途
低血清培养基营养成分优于基础培养基,易使细胞增殖迅速,代谢旺盛,代谢产物对细胞有影响,易产生细胞老化脱落现象。因此需要适当增加换液次数,增加传代频率。获取同样的细胞量,用低血清培养基将比用传统培养基缩短近1/3 的时间,可提高生产效率。
采用199(SLM)低血清培养基培养Vero细胞分泌狂犬疫苗病毒,滴度明显高于采用199 培养基传统培养获得的滴度。采MEM(SLM)低血清培养基BHK21细胞,在本实验情况下12 代内细胞形态和致密度均优于MEM培养基传统培养情况,因而可以预期其产生的口蹄疫、甲肝等疫苗生产的病毒产量将提高。低血清培养基用于反应器Vero细胞狂犬疫苗的生产,实践证明效果良好。采DMEM(SLM)低血清培养基添加1%小牛血清在转瓶中培养CHO细胞生产EOP,可提高收液次数,每次收液表达量明显提高。
2) 培养基中不存在血清中的抗体、补体等成分,对培养细胞影响小;
3) 杂蛋白含量少,生产的产品后期处理较容易,例如疫苗生产由于人用疫苗需要纯化减少杂蛋白,纯化过程中成本消耗很大,疫苗的损失也很大;
4) 无血清培养既可以实现细胞的大规模悬浮培养,增加培养液的利用率,可以采用发酵罐培养减少了人力消耗。
1.应用案例
采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM(SLM)低血清培养基分别培养Vero细胞、BHK21细胞和CHO细胞,新生牛血清用量可以从10%降至3%,减少新生牛血清使用批次和批间差的影响,减少生物制品纯化损失,减少由于不确定蛋白或者其它血清组分带来干扰和差异的风险,提高制品**性。低血清培养基可以在方瓶、3L转瓶、15L 转瓶及生物反应器中培养细胞,在疫苗生产中可以达到低血清高密度的培养效果。低血清培养基营养成分优于基础培养基,易使细胞增殖迅速,代谢旺盛,代谢产物对细胞有影响,易产生细胞老化脱落现象。因此需要适当增加换液次数,增加传代频率。获取同样的细胞量,用低血清培养基将比用传统培养基缩短近1/3 的时间,可提高生产效率。
采用199(SLM)低血清培养基培养Vero细胞分泌狂犬疫苗病毒,滴度明显高于采用199 培养基传统培养获得的滴度。采MEM(SLM)低血清培养基BHK21细胞,在本实验情况下12 代内细胞形态和致密度均优于MEM培养基传统培养情况,因而可以预期其产生的口蹄疫、甲肝等疫苗生产的病毒产量将提高。低血清培养基用于反应器Vero细胞狂犬疫苗的生产,实践证明效果良好。采DMEM(SLM)低血清培养基添加1%小牛血清在转瓶中培养CHO细胞生产EOP,可提高收液次数,每次收液表达量明显提高。
2.概述
无血清培养基是用来在无血清条件下生长特殊类型的细胞或进行专门应用的培养基。一般是由基础培养基和替代血清的补充因子组成。无血清培养基中没有添加血清,但含有个别蛋白或大量蛋白组分。无血清培养基与无蛋白培养基的区别在于培养基中没有添加蛋白,但含有一些动物或植物来源成分,如低分子量肽的水解物。还有一种化学限定培养基,培养基中不含有蛋白、水解产物或未知结构的组分,所有成分均有已知的化学结构。
3.优点:
1) 未知组分少;2) 培养基中不存在血清中的抗体、补体等成分,对培养细胞影响小;
3) 杂蛋白含量少,生产的产品后期处理较容易,例如疫苗生产由于人用疫苗需要纯化减少杂蛋白,纯化过程中成本消耗很大,疫苗的损失也很大;
4) 无血清培养既可以实现细胞的大规模悬浮培养,增加培养液的利用率,可以采用发酵罐培养减少了人力消耗。