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小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
日期:2024-12-25 14:24
浏览次数:482
摘要:小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
背景[1-3]
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)含量。
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒
样本处理要求
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
背景[1-3]
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平。用纯化的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2),再与HRP标记的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)浓度。
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒
样本处理要求
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。