小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤

日期：2024-11-23 19:25

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摘要：小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。 4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤

背景[1-3]
小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平。用纯化的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)，再与HRP标记的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)浓度。

小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒
样本处理要求
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒的操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。