关于动物ELISA试剂盒检测样品注意事项

日期：2024-11-23 18:52

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摘要：动物ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段，即曲线几乎成直线的范围内。 3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。 4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。 5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。 6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。

动物ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意

1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。

动物ELISA试剂盒收集样品、处理及保存方法：

1.血清：操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后，1000*g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离

2.血浆：EDTA，柠檬酸盐，肝素血浆可用于检测。1000*g离心30分钟去除颗粒。

3.细胞上清液：1000*g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000*g离心10分钟，取上清液。

5.保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70°C保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血活高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37°C或更高的温度加热解冻。

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