ELISA试剂盒实验相关问题解答

日期：2024-11-23 18:56

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摘要：1、问：ELISA试剂盒做间接ELISA试剂盒法测试小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外，其余各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么? 回答：可能原因如下： (1) 水质被金属离子等污染;防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。 (2) 洗涤不充分，样品中其它成分残留或酶残留;防止办法洗涤液应注满微孔，充分洗涤。 (3) 移液头重复使用，未洗净或不完全; 防止办法移液头一次性使用。 (4) 酶标板灵敏度过高。 (5) 一抗显色时间的控制等等，关于ELISA的每一步都要注意才行。 2、ELISA试剂盒加样时的防错小经验 (1)用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常容易区分。 (2)可以利用液面反光与没有加的孔加以区别 (3)在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面产生小气泡，也可以加以区分

ELISA试剂盒实验出现相关问题解答
1、问：ELISA试剂盒做间接ELISA试剂盒法测试小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外，其余各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么?

回答：可能原因如下：
(1) 水质被金属离子等污染;防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。
(2) 洗涤不充分，样品中其它成分残留或酶残留;防止办法洗涤液应注满微孔，充分洗涤。
(3) 移液头重复使用，未洗净或不完全; 防止办法移液头一次性使用。
(4) 酶标板灵敏度过高。
(5) 一抗显色时间的控制等等，关于ELISA的每一步都要注意才行。

2、ELISA试剂盒加样时的防错小经验
(1)用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常容易区分。
(2)可以利用液面反光与没有加的孔加以区别

(3)在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面产生小气泡，也可以加以区分

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