介绍ELISA实验稀释血清的步骤

日期：2024-11-21 23:15

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摘要：在实验的过程中，会遇到很多不一样的问题，比如刚开始不知道什么样的ELISA试剂盒好，该选择什么样的ELISA试剂盒来做实验，还有ELISA试剂盒做实验可以稀释血清吗？今天就介绍一下为什么ELISA试剂盒实验要稀释血清。在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释？有两个原因： 1、竞争抑制比较明显，应稀释竞争物； 2、血清中含有的性腺比较低，应该浓缩才对。 ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤：先把蛋白稀释一定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体确定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加酶结合物进行反应，经孵育洗涤后，加底物溶液显色，终止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求＜0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。

在实验的过程中，会遇到很多不一样的问题，比如刚开始不知道什么样的ELISA试剂盒好，该选择什么样的ELISA试剂盒来做实验，还有ELISA试剂盒做实验可以稀释血清吗？今天就介绍一下为什么ELISA实验要稀释血清。

在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释？有两个原因：
1、竞争抑制比较明显，应稀释竞争物；
2、血清中含有的性腺比较低，应该浓缩才对。

ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤：
先把蛋白稀释一定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体确定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加酶结合物进行反应，经孵育洗涤后，加底物溶液显色，终止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求＜0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。

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