如何完善ELISA？

ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay, IA) 是应用免疫学技术测定标本的方法。在检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。那么如何完善ELISA？
1.选择适合您需求的ELISA方法
ELISA可以通过多种方式进行配置，所有这些方式都涉及在封闭前将抗原固定到微孔板表面，用抗体进行探测，并测量产生的信号。稳健的洗涤技术是减少ELISA中背景信号的有效方法之一。优化洗涤步骤的数量、持续时间和体积，以及洗涤缓冲液的去污剂浓度，对于确保去除任何可能影响结果的未结合试剂至关重要。为了获得更一致的ELISA数据。
2.注意标准曲线
标准曲线对于获得定量ELISA结果至关重要，因为它用于计算未知样品的浓度。出于这个原因，用于生产它的参考材料必须是高质量的，并且有足够的数量，以在分析的整个生命周期内实现可重复的性能。ELISA数据通常以相对于测定读数的分析物浓度表示，可以是比色，荧光或化学发光。在标准曲线范围内使用更多点（理想情况下为8个或更多）提供了消除异常值的灵活性，并在信号响应范围内更好地定义曲线以改进拟合。
3.确保可重复性和准确性
可重复性和准确性对于任何免疫测定都是必不可少的，但当定量ELISA 数据用于推动关键决策时，要求可能特别严格。为了额外保证检测间的重现性，添加另一个内部对照来补充标准曲线可提供更大的结果可信度。作为一般规则，重复读数的变异系数 (CV) 不应超过 20%。