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ELISA试剂盒需把握的关键

日期:2024-11-22 00:36
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摘要:ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色...
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
ELISA法由于操作简略,已被广泛应用,咱们就来谈谈ELISA试剂盒需把握的关键有哪些?
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。一切试剂瓶盖须盖紧以避免蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致呈现错误的结果。
2. 小心汲取试剂并严格遵守给定的孵育时刻和温度。请注意在汲取标本/规范品,酶结合物或底物时,一个孔与一个孔加样之间的时刻距离假如太大,将会导致不同的“预孵育”时刻,然后明显地影响到测量值的准确性及重复性。
3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20C,部分试剂保存于2-8C,具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐分出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚敞开的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对试验结果造成任何影响。
6. 一切的样品都应管理好,依照规则的程序处理样品和检测设备。
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