产品名称：Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)测试盒(分光光度法)

测定方法:    分光光度法
测定规格:    50管/24样
保存条件:    低温避光保存
有 效 期:      6个月
注     意:      正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

 测定意义:

GOGAT 广泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成 GS/GOGAT 循环,参与氨同化的调控。GOGAT 分为以 NADH 为还原剂的 NADH-GOGAT 和以铁氧还蛋白为还原剂的 Fd-GOGAT。Fd-GOGAT 主要存在于叶绿体基质中,与光合作用和光呼吸有关,主要同化 NO3-还原和光呼吸产生的 NH4+。

测定原理:

Fd-GOGAT 催化谷氨酰胺的氨基转移到 α-酮戊二酸,形成两分子的谷氨酸,谷氨酸脱氢酶催化谷氨酸的脱氢反应,同时产生 NADH,使 WST-8 显橙黄色,在 450 nm 下测定吸光值。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 6mL 试剂六溶解待用,用不完的试剂 4℃保存;试剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 5mL 蒸馏水溶解待用,用不完的试剂 4℃保存;试剂四:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 50mL 试剂六溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂五:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存;
试剂六:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;