产品名称：6-磷酸葡萄糖酸脱氢(6PGDH)测试盒(微量法)

6-磷酸葡糖糖酸脱氢酶(6PGDH)测试盒
测定方法:  微量法
测定规格:  50管/48样
保存条件:  低温避光保存
注    意：  正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）和6PGDH依次催化NADPH合成，与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外，6PGDH逆境生理中具有重要作用。

测定原理：
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH，NADPH在340 nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm吸光度增加速率，计算6PGDH活性。
自备仪器和用品：
低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板和蒸馏水。

粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备：
培养细胞：先收集或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为1000~5000：1的比例（建议2000万或细胞加入1mL提取液），超声波破碎或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定操作：
1. 酶标仪预热30min，调节波长到340 nm。
2将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解；在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3. 取96孔板，依次加入10μL样本190μL试剂一，于340nm处测定3min内吸光值变化，第10 s吸光值记为A1，第190s吸光值记为A2。△A=A2-A1
注意：空白管只需要做一次。