脂质过氧化物(LPO)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/96样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即 ROS 与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成 LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO 常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些的病理过程,如感染、炎 症、自身免疫、以及衰老等生理过程密切相关。
测定原理:
LPO 在酸性条件下加热,产生小分子终产物 MDA,MDA 与硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 535nm 有 吸收峰。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
LPO 提取:
1、细胞或组织样品的制备:
培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。