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成份 |
N+2 个样品管 |
PCR 阴性对照 |
PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
Skalicky烟霜霉病菌PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 阴性对照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 阳性对照(Skalicky烟霜霉病菌PCR阳性对照1000倍稀释液) |
-- |
-- |
18μL |
使用方法:
成份
N+2 个样品管
PCR 阴性对照
PCR阳性对照
PCR Magic Mix 3.0
各 20μL
20μL
20μL
Skalicky烟霜霉病菌PCR 引物混合液
各2μL
2μL
2μL
N+2个样品DNA模板
各18μL
--
--
PCR 阴性对照(水)
--
18μL
--
PCR 阳性对照(Skalicky烟霜霉病菌PCR阳性对照1000倍稀释液)
--
--
18μL
4. 按下表设置 PCR 反应:
过程 |
温度 |
时间 |
预变性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反应(35 个循环) |
95℃ |
30 sec |
55℃ |
30 sec |
|
72℃ |
40 sec |
|
延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。