规格及成分:
编号
成分
规格
试剂一
PCR MagicMix 3.0
1 mL(红盖)
试剂二
超纯水
1 mL(亮黄色)
试剂三
槟榔PCR鉴定鉴定引物混合液
100 μL(白盖)
试剂四
槟榔PCR鉴定鉴定阳性对照(1×10E8 /μL)
50 μL(黄盖)
试剂五
使用手册
1 份
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
槟榔PCR鉴定试剂盒
使用方法 :
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL槟榔PCR鉴定鉴定阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成份 |
N+2 个样品管 |
PCR 阴性对照 |
PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
槟榔PCR鉴定鉴定引物混合液 |
各 2μL |
2μL |
2μL |
N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 阴性对照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 阳性对照(槟榔PCR鉴定鉴定阳性对照1000倍稀释液) |
-- |
-- |
18μL |
过程 |
温度 |
时间 |
预变性 |
95℃ |
5 min |
PCR 反应(35 个循环) |
95℃ |
30 sec |
55℃ |
30 sec |
|
72℃ |
40 sec |
|
延伸 |
72℃ |
7 min |