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编号 |
成分 |
规格 |
试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1 mL(红盖) |
试剂二 |
超纯水 |
1 mL(亮黄色) |
试剂三 |
里氏立克次氏体 PCR 引物混合液 |
100 μL(白盖) |
试剂四 |
里氏立克次氏体 PCR 阳性对照(1×10E8 /μL) |
50 μL(黄盖) |
试剂五 |
使用手册 |
1 份 |
使用方法:
成份 |
N+2 个样品管 |
PCR 阴性对照 |
PCR阳性对照 |
PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
里氏立克次氏体PCR 引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
PCR 阴性对照(水) |
-- |
18μL |
-- |
PCR 阳性对照(里氏立克次氏体PCR阳性对照1000倍稀释液) |
-- |
-- |
18μL |
过程
温度
时间
预变性
95℃
5 min
PCR 反应(35 个循环)
95℃
30 sec
55℃
30 sec
72℃
40 sec
延伸
72℃
7 min
三、电泳检测:
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。