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产品详情
  • 产品名称: 精液基因组DNA提取试剂盒

  • 产品型号: 200T
  • 产品厂商:通蔚生物
  • 产品价格:1978
  • 折扣价格:117
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简单介绍:
精液基因组DNA提取试剂盒本试剂盒适用于精液基因组 DNA 的提取。试剂盒采用了独特的细胞裂解体系降解蛋白,结合硅胶膜特异吸附核酸的原理,可快速纯化得到高质量的基因组DNA。使用本试剂盒得到的基因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行PCR、酶切和杂交等相关分子生物学实验。
详情介绍:
产品及特点
试剂盒适用于精液基因组 DNA 的提取。试剂盒采用了独特的细胞裂解体系降解蛋白,结合硅胶膜特异吸附核酸的原理,可快速纯化得到高质量的基因组DNA。使用本试剂盒得到的基因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行PCR、酶切和杂交等相关分子生物学实验。

它具有下列特点:
1. 简便快速,可快速获得高纯度的基因组 DNA;
2. 重复性好,产量高;
3. 完全去除污染物和抑制剂,便于下游应用。


成分规格

Buffer GL

12ml

25ml

50ml

Buffer GTL

12ml

25ml

50ml

Buffer W1(concentrate)

13ml

26ml

52ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶 K 于-20℃ ,其他组分室温(15 - 25℃),可保存12 个月

本产品仅供科研使用,不得用于其它用途


使用方法
自备试剂
DTT、无水乙醇、RNase A(可选)。
注 意:Buffer W1 和 Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
1. 吸取 50-100ul 新鲜或冷冻精液,加入200 ul Buffer GTL,再加入1MDTT30 ul混匀。
2. 加入 20 ul Proteinase K 溶液,充分混匀,在 56℃放置,直至组织完全溶解。
3. 加入 200 ul Buffer GL,充分混匀,70℃水浴或金属浴处理10 min,期间每隔一段时间震荡离心管,溶液变得清亮后短暂离心,以去除管盖内壁的水珠。
注 意:Buffer GL 加入时可能会产生白色沉淀,一般70℃时会消失,不影响后续实验,如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取的DNA量少或者提取的DNA不纯)
4. 加入 200 ul 无水乙醇,充分震荡,此时可能会出现絮状沉淀,短暂离心以去除管盖内壁水珠。
5. 将所得溶液和絮状沉淀转移到离心吸附柱中,12,000 rpm 离心30 sec,弃收集管中的滤液。
6. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer W1,室温12,000 rpm离心30 sec,弃收集管中滤液。

注 意:Buffer W1 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖以防酒精挥发)

7. 向吸附柱内加入 600 ul Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心30 sec,弃收集管中滤液。
注 意:Buffer W2 为浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后应立即盖紧瓶盖以防酒精挥发)

8. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer W2,室温 12,000 rpm 离心2min,弃收集管中滤液。

9. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管(自备)中,加入50 - 100 ul Buffer EB,室温放置 2 min。10,000 rpm 离心 1 min,离心管底溶液即基因组DNA。

注 意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在 7.0 - 8.5 之间,为了增加基因组 DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2 min,再次离心收集)

注意事项
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解。
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降。
3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。
4. 按要求在 Buffer W1/W2 中加入无水乙醇。
精液基因组DNA提取试剂盒

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