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产品详情
  • 产品名称:干血斑基因组DNA提取试剂盒(0.1-1ML)

  • 产品型号: 200T
  • 产品厂商:通蔚生物
  • 产品价格:2630
  • 折扣价格:135
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简单介绍:
干血斑基因组DNA提取试剂盒(0.1-1ML)本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取干血斑 中的基因组 DNA。所提 DNA 分子纯度高,可直接进行 PCR、Real-Time PCR 和杂交等相 关分子生物学实验,整个过程an全可靠、简单快速。
详情介绍:
产品及特点
本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取干血斑 中的基因组 DNA。所提 DNA 分子纯度高,可直接进行 PCR、Real-Time PCR 和杂交等相 关分子生物学实验,整个过程an全可靠、简单快速。

它具有下列特点:
1. 简便快捷:操作快速方便;
2. 稳定可靠:得率高,纯度好,重复性强。

成分规格

Buffer GTL

15ml

30ml

60ml

Buffer GL

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10 ml

10 ml

30ml

Buffer W1(concentrate)

13ml

26ml

52ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

30ml

60ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1 ml

Spin Columnwith Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶K 于-20℃, 其他组分室温(15 - 25℃),可保存 12 个月。

本产品仅供科研使用,不得用于其它用途

使用方法
自备试剂
无水乙醇、RNase A(可选)。

样本采集、保存和运送
1. 样本:按照滤纸干血斑采集方法进行采集。
2. 样本保存:经上述采集的待测样本可立即用于处理,或在密封,干燥(湿度低于30%), 2-8°C 条件下保存(此条件下可保存 5 年)。样本运送时应将滤纸干血斑密封,采用泡 沫箱加冰运输。

提取步骤
注 意:使用前请先在缓冲液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签)
1. 取三片 3×3 mm 的干血斑样品到 1.5 ml 的离心管(自备)中,加入 200 ul Buffer GTL,
20 ul 蛋白酶 K  ,混合均匀,56℃恒温震荡器中,900 rpm 恒温震荡 1 h。
2. 加入 200 ul Buffer GL 涡旋混匀,70℃恒温震荡器中,900 rpm 恒温震荡 10 min。
3. 加入 200 ul 无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心收集管壁上的液体。
4. 将一吸附柱放入收集管中,将液体全部转入到吸附柱中,10000 rpm离心30 s ,弃滤 液。
5. 向吸附柱中加入 500 ul Buffer W1 ,10000 rpm 离心 30 s ,弃滤液。
注 意:按要求在 Buffer W1 中加入无水乙醇,用后及时盖紧, 以防乙醇挥发)
6. 向吸附柱中加入 600 ul 漂洗液 Buffer W2 ,10000 rpm 离心 30 s ,弃滤液。
注 意:按要求在 Buffer W2 中加入无水乙醇,用后及时盖紧, 以防乙醇挥发)
7. 重复操作步骤 6 一次。
注 意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
8. 将吸附柱放回收集管中,12,000 rpm 离心 2 min ,以去除吸附膜上的乙醇。
9. 将吸附柱转入一干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加 20 - 50 ul Buffer EB, 室温放置 2 min ,10000 rpm 离心 1 min ,收集 DNA。
(注 意:洗脱液体积不应少于 20 μl ,体积过小影响回收效率。为增加基因组 DNA 的得率,可将离心  得到的溶液再次加入吸附柱中,室温放置 2 min ,10000 rpm 离心 1 min 。洗脱液的 pH 对于洗脱效率 有很大影响。若用水作洗脱液应保证其 pH 值在 7.0 - 8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率)

注意事项
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解。
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降。
3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。


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