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产品详情
  • 产品名称: Multiplex PCR Kit

  • 产品型号: 100次×20ul
  • 产品厂商:通蔚生物
  • 产品价格:460
  • 折扣价格:116
  • 产品文档:
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简单介绍:
Multiplex PCR Kit多重 PCR 是指在单个 PCR 反应中同时对多个基因座位进行扩增的PCR技术,操作步骤和普通 PCR 相同,但可同时检测多个片段,在科学研究和疾-病诊断等多个领域有重要意义。本试剂盒含有多重 PCR 专用热启动 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase,具有极高的扩增特异性和灵敏度。配合针对多重 PCR 反应深度优化的专用缓冲液5×Multiplex Buffer,特别适用于微量样本的多位点检测。
详情介绍:

产品特点
多重 PCR 是指在单个 PCR 反应中同时对多个基因座位进行扩增的PCR技术,操作步骤和普通 PCR 相同,但可同时检测多个片段,在科学研究和疾-病诊断等多个领域有重要意义。本试剂盒含有多重 PCR 专用热启动 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase,具有极高的扩增特异性和灵敏度。配合针对多重 PCR 反应深度优化的专用缓冲液5×Multiplex Buffer,特别适用于微量样本的多位点检测。

它具有以下特点:
1. 适用范围广,可以高效地完成绝大多数多重 PCR 检测;
2. 扩增稳定,可以大程度地减少反应体系优化步骤;
3. 扩增缓冲高度优化,较大程度上抑制非特异性扩增。
4. 单独的镁离子成分,可根据实验需求自行调整。

成份规格

产品组成

规格

5×Multiplex Buffer(无 MgCl2)

210μl / 420μl

Multiplex DNA Polymerase

60μl / 110μl

dNTP(10mM)

30μl /60μl

MgCl2(25mM)

60μl / 120μl

-20℃保存一年

本产品仅供科研使用 ,不得用于其它用


使用方法
注 意:以下举例推荐PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)
1.PCR体系推荐反应体系(20μl)

试剂

用量

模板 DNA

< 1μg

Primer mix (10 μM each)

0.5μl

5×Multiplex Buffe(无MgCl2)

4μl

Multiplex DNA Polymerase

1μl

MgCl2(25mM)

 1μl

dNTP(10mM)

0.5μl

ddH2O

Up to 20μl


注 意:
推荐引物反应终浓度为每条引物 0.1 μM,可在 0.05 - 0.4 μM 之间调整。MgCl2终浓度可在 1.0 - 4.0 mM之间调整。
2. PCR 反应程序

过程

温度

时间

预变性

95℃

5min

2535cycles

变性

95℃

30sec

退火

60

30sec

延伸

72℃

60sec/kb

后延伸

72℃

5min


注意:
A. 多数情况下,使用默认退火温度即可。如扩增效果不佳,可通过设置退火温度梯度实验来摸索适退火温度。
B. 预变性时间为 5 min,用于充分释放酶活。请勿降低温度或缩短时间。
C. 对于低拷贝模板、长片段或者扩增片段较多的情况,可延长退火时间至 3 min 以提高扩增效率。
D. 延伸时间以长片段为准设定。适度延长延伸时间有助于提高扩增产量且有利于困难模板扩增。延伸时间过长可能会导致非特异性扩增增多。
E. 扩增微量样本时,可通过增加循环数提高扩增产物量。循环数过多可能会导致非特异性扩增增多。
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