Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer) 500 U,2.5 U/ul 上海通蔚实业有限公司

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产品详情

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产品名称： Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)
产品型号： 500 U,2.5 U/ul
产品厂商：通蔚生物
产品价格：253
折扣价格：120
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简单介绍：

Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’外切核酸酶活性，较弱的 3’-5’外切酶活性。在PCR中，该酶延伸速度为 1 ~ 2 kb/min，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。一般用于DNA片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等。

详情介绍：

Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)

产品特点

Taq Plus DNA Polymerase 是从克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD，经与 Pfu 按一定比例混合而成，该酶可增强扩增的保真性，大大增强扩增的特异性和扩增效率。

Taq Plus DNAPolymerase具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’外切核酸酶活性，较弱的 3’-5’外切酶活性。在PCR中，该酶延伸速度为 1 ~ 2 kb/min，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。一般用于DNA片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等。

成分规格

产品组成	规格
Taq Plus DNA polymerase	250Ｕ/ 2.5U/μl
10 × Taq Plus Buffer（含 Mg2+）	1m / 2*1 ml
-20℃，有效期 1 年
本产品仅供科研使用，不得用于其它用途

使用方法

注意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）

1. PCR 体系：

推荐体系（50μl）

试剂

用量

模板 DNA

< 1μg

10 × Taq Plus Buffer

5μl

dNTP Mixture(2.5 mM each)

4μl

Primer 1 (10 μM)

2μl

Primer 2 (10 μM)

2μl

Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/μl)

0.5 ~ 1μl

ddH2O

Up to 50μl

A 引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
B 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）

2. PCR 程序

过程		温度	时间
预变性		94℃	5min
25－35cycles	变性	94℃	30sec
	退火	55－65℃	30sec
	延伸	72℃	1kb/30sec
	终延伸	72℃	5min

注意：

A 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

b 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq Plus DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/30 sec。

C 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）

3. 结果检测：

反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

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试剂	用量
模板 DNA	< 1μg
10 × Taq Plus Buffer	5μl
dNTP Mixture(2.5 mM each)	4μl
Primer 1 (10 μM)	2μl
Primer 2 (10 μM)	2μl
Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/μl)	0.5 ~ 1μl
ddH2O	Up to 50μl

产品名称： Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)