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编号 |
成分 |
规格 |
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试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1 mL（红盖） |
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试剂二 |
超纯水 |
1 mL（亮黄色） |
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试剂三 |
白茅根PCR鉴定引物混合液 |
100 μL（白盖） |
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试剂四 |
白茅根PCR鉴定阳性对照（1×10E8 /μL） |
50 μL（黄盖） |
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试剂五 |
使用手册 |
1 份 |
白茅根PCR鉴定试剂盒
使用方法 ：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL白茅根PCR鉴定阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
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成份 |
N+2 个样品管 |
PCR 阴性对照 |
PCR阳性对照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
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白茅根PCR鉴定引物混合液 |
各 2μL |
2μL |
2μL |
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N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
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PCR 阴性对照（水） |
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18μL |
-- |
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PCR 阳性对照（白茅根PCR鉴定阳性对照1000倍稀释液） |
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18μL |
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过程 |
温度 |
时间 |
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预变性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反应（35 个循环） |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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延伸 |
72℃ |
7 min |