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PCR技术DNA变性简述
日期：2025-04-27 09:06
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摘要：PCR技术DNA变性简述
DNA变性是指核酸双螺旋结构中碱基对的氢键断裂，使得双链变为单链的过程。
对双链DNA进行加热可以使其发生变性，当温度升高到一定高度时，DNA在260nm处的吸光度会突然发生明显的上升，并达到zui大值，之后温度继续上升，其吸光度也不会发生明显变化，若以温度对DNA溶液的260nm吸光度做图，会得到典型的DNA变性S型曲线。
DNA的变性是在一个很窄的温度范围内发生的，通常将核酸加热变性过程中，紫外光吸收值达到zui大值50%时的温度称为核酸的熔解温度 (Tm, melting temperature)。
1、特定核酸分子的Tm值与其G+C含量成正相关，GC% = (Tm-69.3) × 2.44；
2、Tm值的大小还与核酸分子的长度有关，核酸分子越长，Tm值越大；
3、粒子强度越高，熔解温度越高，熔解温度范围越窄。