污染是细胞培育的大敌。预防和避免污染是细胞培育成功的要害之一。一开始就要十分重视,避免污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,并且浪费人力、物力,乃至形成无法弥补的丢失。 细胞培育中常见的生物污染类型有6种,分别是xi菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真jun污染以及非细胞污染。他们在细胞培育中污染的特点如下:
1.支原体:黑色的,好象多为多形,培育液一般培育液一般会污浊,原体感染,国内血清许多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中常见的微生物之一。并且它不能用过滤的办法除掉。支原体感染细胞以后,细胞病变不很显着,只是渐渐死qu。
2. 真jun:一般培育液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真jun 开始很像死细胞碎片,只是它许多许多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,渐渐的会长出很细的黑色丝状物。真jun 成长的比较慢,不象xi菌那么简单被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
3. 黑胶虫:能够穿透滤膜,也能够通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培育液也是不浑的,一般不会太影响,细胞仍是能够用的。常常是细胞成长状态杰出,且观测到的运动物无显着增多,且培育液色彩、透明度无显着变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞成长状态不会有显着影响,在细胞增殖旺盛之后会天然消失,除替换血清外无须特别处理。
4. 非同种细胞污染 :便是细胞交叉污染,因为细胞培育操作时各细胞株所需的器件和溶液没有严格分隔,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。
5. 原虫:培育液可细微污浊,显微镜下那些细微的点状物数量十分多,细微活动,细胞虽然能够成长但繁殖速度却显着减慢,并且细胞状态欠好,边际不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺养分。这种共生是十分普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常成长,只有当他们抵达必定的数量时就会影响到细胞的成长,终形成恶性循环。
6. xi 菌:xi 菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,依据感染xi菌的不同,可有不同的外形,培育液一般会污浊变黄,对细胞成长影响显着。
现在,世界上已有几十种细胞都被 HeLa 细胞所污染,致使许多试验宣告无效。���细胞培育物所形成的化学成分的污染也偶有发生,大多是因为细胞培育所需物品清洗消du 不彻底而带入一些有毒化学物质所造成的。