聚合酶链式反应(PCR)实验注意事项:
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。*好设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用*高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤chu 菌或高压灭jun 。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭jun的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭jun。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。