蛋白质印迹法(免yi印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免yi遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是在电场的作用下将电泳分离的多肽从SDS-PAGE凝胶转移至一种固相支持体,然后用这种多肽的特异抗体来检测。Western blot一般流程:
蛋白样品的制备:
1、水溶液提取法:稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解 度大,是提取蛋白质zui 常用的的溶剂,操作相对麻烦,重复性一般;
2、有机溶剂提取法;
3、离心管柱提取法:超快速,易用,高产及重复性强;
4、通过层析或电洗脱法制备目的蛋白。