蛋白浓度是指在一定体积或单位质量的样品中,蛋白质所占的体积或质量比例。
酪安酸差色光谱法:
1. 打开分光光度剂,预热30分钟,是紫外灯处于稳定发光状态。
2. 在2容积为1mlde 微量石英比色杯中分别加入900ulPH7.4,PH12.0的0.1mol/l磷酸缓冲液,把盛有PH12.0���冲液的比色杯放入样品杯中放入支架上,把盛有PH7.4缓冲液的比色杯放入到参比杯的支架上,然后准确的测出295nm波长下的光吸收值,或用250-350nm扫描。
3. 在上述的2个比色杯中分别加入100UL的待测样品液,小心振荡混匀。
4. 重复2操作
5. 计算蛋白浓度:﹝(PH为12.0A295-PH为7.4A295)/2.330×N﹞×W
N是蛋白分子中酪安酸毫摩尔消光系数之差。
W是样品稀释倍数。