荧光染料优缺点

荧光染料也称DNA结合染料，目前主要使用的染料分子是SYBR Green I，SYBR Green I能与DNA双链的小沟特异性的结合，游离的SYBR Green I几乎没有荧光信号，但结合双链DNA后，其荧光信号可呈数百倍的增加。随PCR产物的增加，PCR产物与染料的结合量也增大，其荧光信号强度代表双链DNA分子的数量。

荧光染料的优点：

1. 使用简便；

2. 可以与任何PCR产物结合；

3. 价格便宜；

荧光染料的缺点：

1. 不能区分不同的双链DNA

2. 引物二聚体会影响检测的敏感性

3. 非特异性产物会影响结果的敏感性

引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别，进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。

总的来说，SYBR Green I方法是一种*基础也*常用的Real-time qPCR实验手段。