细胞培养的基本生理条件:
在细胞培养过程中,应根据离体细胞的特点和培养条件,提供满足其生长和发育的一些基本生理条件:
1、必须保证在无菌条件下进行。细胞感染微生物后,会因被夺营养物质而导致细胞生长缓慢或停滞,甚至死亡。
2、需要提供适宜的温度和CO2浓度。一般哺乳动物细胞培养的温度控制在37℃,鱼类的温度要低一些。温度过高或过低,均不利于细胞生长甚至会导致细胞死亡。在细胞培养过程中需要提供一定量的气体(O2和CO2)。CO2具有调节pH和缓冲的作用,一般提供5% CO2。
3、细胞离体培养技术的关键是细胞培养基。细胞培养基中需含有细胞增殖、生长所需要的各种营养物质,如提供能量的物质(N源、C源)、代谢调节控制的物质(无机盐、维生素、激ji)。理想的细胞培养液可以同时满足细胞离体培养所需要的pH、渗透压、营养物质、调节物质等的全部需要。动物细胞适宜pH一般控制在7.2~7.4,在此范围细胞生长活跃,增殖速度快,如果PH过低或过高,细胞将因为细胞膜受损而死亡。