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ELISA实验样本稀释原则

日期:2025-04-26 13:21
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摘要: ELISA(酶联免 疫吸附试验)是一种广泛应用于检测生物分子,如蛋白质、抗体和抗原等的重要技术。如何确定测定样本的稀释倍数呢?样本稀释的原则如下: 在查询背景知识,或者通过预实验,确认了样本浓度过高,需要进行稀释,就要根据以下原则,严谨操作和计算。 1、稀释倍数合理。稀释后样本测定的OD值,要求落在标准品高值OD值的半量程内,假定标准品高值的OD值是2.4,那么稀释后的样本,OD值接近1.2,在这个范围附近,计算的浓度值为准确,以这个结果乘以稀释...

ELISA(酶联免 疫吸附试验)是一种广泛应用于检测生物分子,如蛋白质、抗体和抗原等的重要技术。如何确定测定样本的稀释倍数呢?样本稀释的原则如下:


在查询背景知识,或者通过预实验,确认了样本浓度过高,需要进行稀释,就要根据以下原则,严谨操作和计算。


1、稀释倍数合理。稀释后样本测定的OD值,要求落在标准品高值OD值的半量程内,假定标准品高值的OD值是2.4,那么稀释后的样本,OD值接近1.2,在这个范围附近,计算的浓度值为准确,以这个结果乘以稀释倍数,得到的样本浓度准确。


2、稀释过程规范。特别是大倍比的稀释,好是梯度稀释。比如样本要稀释200倍,就先稀释10倍,再在10倍稀释的基础上,再进行稀释20倍,得到200倍。


3、样本取样量不要太小。在样本充足的情况下,样本取样量不要低于5uL,越低的取样量,在混匀取样过程中,误差越大。


综上所述,为了确保ELISA实验中样本稀释的准确性,我们需要注意稀释液的选择、稀释比例的确定、正确的操作方法以及质量控制等方面。只有在这些方面都做得足够好,我们才能确保实验结果的可靠性和有效性。


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