实验细胞常用的染色操作：
1、消化收集细胞，以2-10×103 cell/coverslip 接种细胞于24孔板中，滴加细胞悬液50-100µl，2小时后补加10%FBS+DMEM500µl
2、37℃细胞培养箱中培养48小时后，显微镜下观察，取细胞状态和细胞数量适应的玻片做染色。
3、去掉旧培养液，用冰冷的PBS洗两次，加3.7-4%甲醛0.5ml(in PBS)室温固定10min
4、PBS洗两次，加穿膜液0.5ml(0.1%triton X-100+0.1M Gycine)冰上30min
5、PBS洗两次，加5mg/ml BSA 0.3ml室温封闭1小时。
6、PBS洗两次，取一张封口膜，做好标记，加一抗(用5mg/ml BSA稀释1：50-100)25µl于封口膜上，将盖玻片细胞面朝下反扣在一抗液滴上，放在湿盒中室温孵育1-3小时，将盖玻片从封口膜上小心夹起，细胞面朝上放入原来的24孔板中，PBS洗两次，取另外一张封口膜，做好标记，加二抗(羊抗兔罗丹明，用5mg/ml BSA稀释1：50-100）25µl��封口膜上，将盖玻片细胞面朝下反扣在一{二}抗液滴上，放在湿盒中室温黑暗中孵育1-3小时
7、同上PBS洗两次，同上操作，将玻片与10µl DAPI （1µg/ml in PBS，贮存液：1mg/ml in dd H2O）室温孵育1-5min.
8、PBS 洗三次，将玻片背面的水分擦干，封片于载玻片上，做好标记（时间，细胞名称，实验内容，号码）
9、待封片胶干后可在荧光显微镜下观察，观察时注意记录每张玻片的内容以免混淆，观察完后将玻片放-20℃保存。
10、若只观察转染了EYFP的荧光蛋白，不需要给内源蛋白染色，可直接用DAPI染核后封片。
11、以BSA (5mg/ml)代替一抗，二抗照加为染色的对照组，做法同上。为了保证实验有重复性，每次做平行2组以上。