犬细小病毒(CPV)试剂盒荧光-PCR法

产品特点: 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内**的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤高压。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
人解脲脲原体抗体(UU-Ab)试剂盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit 偶氮荧光桃红,酸性红1  Azophloxine  质量规格：BS

人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit 曙红Y,醇溶剂红 43  Eosin Y ,alcohol solution  质量规格：AR

人解整合素样金属蛋白酶12(ADAM12)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit 曙红B  Eosin B  质量规格：BS

人解整合素样金属蛋白酶15(ADAM15)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit 固深红 GBC  Fast Garnet GBC Salt  质量规格：BS,90%

人解整合素样金属蛋白酶19(ADAM19)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit 固红 3 GL  Fast Red 3 GL Salt  质量规格：BS

人解整合素样金属蛋白酶33(ADAM33)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit 固红 KL盐  Fast Red KL Salt  质量规格：BS

人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 固红B  Fast Red B Salt  质量规格：>90%

人解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 固红-萘磺酸 TR  Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt  质量规格：≥90%(TLC)

人金葡菌肠(SE)ELISA检测试剂盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SE 96T/48T 丽春红S  Ponceau S  质量规格：BS

人金属硫蛋白(MT)ELISA检测试剂盒HumanMetallothionein,MT 96T/48T 环丙贝特  Ciprofibrate  质量规异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA检测试剂盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T 蓝[pH指示剂]  Bromochlorophenol Blue  质量规格：pH指示剂

大鼠血清素受体2A/5-羟色胺受体2A(5-HT-2A)试剂盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit 乙基橙[pH指示剂]  Ethyl Orange  质量规格：pH指示剂

英文名称RatadiponectinELISAKit大鼠脂联素(adiponectin)ELISAKit规格：96T/48T 4-乙氧基橘红盐酸盐(>95.0%(T))  4-Ethoxychrysoidine   质量规格：>95.0%(T)

高多糖/酚植物线粒体DNA萃取试剂盒10/20 DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并恶二唑  DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]  质量规格：用于蛋白质组分析，用于高效液相色谱标记，荧光染料，用于质谱的衍生化试剂

ELISAKitf-Hb人游离血红蛋白规格：48T/96T 2,3-萘二醛(>99.0%(GC))  2,3-Naphthalenedialdehyde  质量规格：>99.0%(GC)

小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒 ，英文名： Gzms-B ELISA Kit DBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(HPLC))  DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]   质量规格：>98.0%(HPLC)

大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA检测试剂盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T N-(1-芘基)马来(>97.0%(HPLC))  N-(1-Pyrenyl)maleimide  质量规格：>97.0%(HPLC)
CM-R067大鼠肾足突细胞完全培养基100mL2-(5-溴-2-偶氮)-5-(二乙基)本酚100毫克保存：-20℃

EC109，人食管癌细胞CBZ-D-缬酸 CBZ-D-Valine,99% 1685-33-2 5G 通用试剂

EB病毒转化的人B细胞;KMY0926 人脑动脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL录加醋异炳酯(约30%的本,约2mol/L)(+4℃) Isopropyl xlonofonmctq108-3-6

大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]动力-吲哚-尿素培养基基础shēng huà shì jì容量：25克

IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 79803-73-93-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸钠 (MOPSO-Na)MOPSO wo7ium salt
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。